Question
Download Solution PDFनिम्न कथनें लेसर स्कैनिंग कोनफोकल माइक्रोस्कोप (LSCM) के सन्दर्भ में बनाए गये।
A. कोहलर (Köhler) प्रदीप्ति प्रणाली - युक्त LSCM एक विस्तृत क्षेत्र तकनीक है।
B. यदि एक एयरी डिस्क के केवल केन्द्रीय अंश का उपयोग एक चित्र के निर्माण में किया जाये तो विस्तृत क्षेत्र चित्रण में प्राप्त किए गये विभेदन की तुलना में उच्चतर त्रिविम विभेदन प्राप्त किया जा सकता है।
C. क्रमवीक्षण दर्पणें (Scanning mirrors), उद्दीपन किरण को चित्र निर्माण करने के लिए नमूनें के ऊपर बिंदु से बिंदु तक घुमाता है।
D. सूची छिद्र (pinhole) का एक परिवर्तित आकार चित्र के विभेदन पर कोई प्रभाव नहीं डालता है।
E. LSCM में प्रकाश इलेक्ट्रान संवर्धक (photomultiplier) नलिका प्रतिदीप्तों का वास्तविक रंग उत्पन्न करने में सहायता करता है।
निम्नांकित कौन सा एक विकल्प सभी सही कथनों के मेल को दर्शाता है?
Answer (Detailed Solution Below)
Detailed Solution
Download Solution PDFसही उत्तर विकल्प 3 अर्थात केवल B तथा C है।
अवधारणा:
लेसर स्कैनिंग कोनफोकल माइक्रोस्कोप (LSCM)
- लेजर स्कैनिंग कन्फोकल माइक्रोस्कोपी (LSCM) एक शक्तिशाली इमेजिंग तकनीक है जिसका उपयोग जीवन विज्ञान के विभिन्न क्षेत्रों में जैविक नमूनों की उच्च-रिज़ॉल्यूशन चित्र प्राप्त करने के लिए किया जाता है।
- यह बेहतर स्थानिक रिजोल्यूशन, कम पृष्ठभूमि शोर, तथा नमूनों के विस्तृत त्रि-आयामी पुनर्निर्माण की क्षमता प्रदान करके पारंपरिक वाइड-फील्ड माइक्रोस्कोपी की तुलना में महत्वपूर्ण लाभ प्रदान करता है।
लेसर स्कैनिंग कोनफोकल माइक्रोस्कोप की मुख्य अवधारणाएँ:
संचालन का सिद्धांत:
- LSCM बिंदु रोशनी और बिंदु पहचान के सिद्धांत पर आधारित है।
- एक केंद्रित लेजर किरण नमूने पर स्कैन करती है, तथा एक समय में एक बिंदु को प्रकाशित करती है।
- नमूने से उत्सर्जित प्रतिदीप्ति प्रकाश को एक पिनहोल एपर्चर के माध्यम से एकत्र किया जाता है, जिससे केवल फोकल प्लेन से प्रकाश ही गुजर पाता है।
- यह स्थानिक फ़िल्टरिंग फोकस से बाहर के प्रकाश को हटा देती है, जिसके परिणामस्वरूप कंट्रास्ट और रिज़ॉल्यूशन में सुधार होता है।
कन्फोकल एपर्चर:
- कॉन्फोकल एपर्चर (पिनहोल) का उपयोग LSCM की एक परिभाषित विशेषता है।
- यह उत्सर्जित प्रकाश के संग्रह को एक विशिष्ट तल तक सीमित कर देता है, तथा फोकल तल के ऊपर या नीचे से आने वाले प्रकाश को समाप्त कर देता है ।
- इससे अक्षीय विभेदन में वृद्धि होती है, जिससे नमूनों के भीतर पतले भागों की स्पष्ट चित्र प्राप्त करना संभव हो जाता है।
स्कैनिंग तंत्र:
- स्कैनिंग दर्पण लेजर किरण को नमूने पर रेखापुंज पैटर्न में निर्देशित करते हैं।
- विभिन्न बिंदुओं से प्रतिदीप्ति का क्रमिक संग्रह एक द्वि-आयामी छवि उत्पन्न करता है।
- कई विमानों (z-स्टैक) के माध्यम से स्कैनिंग करके, LSCM तीन आयामी छवियों का निर्माण कर सकता है, जिससे शोधकर्ताओं को नमूने के भीतर संरचनाओं के स्थानिक वितरण की कल्पना करने की अनुमति मिलती है।
बेहतर स्थानिक संकल्प:
- LSCM, फोकस से बाहर के प्रकाश को अस्वीकार करने की अपनी क्षमता के कारण, वाइड-फील्ड माइक्रोस्कोपी की तुलना में उच्च स्थानिक रिजोल्यूशन प्राप्त करता है।
- यह विशेष रूप से जटिल विवरणों वाली संरचनाओं की इमेजिंग के लिए फायदेमंद है, जैसे कि कोशिकीय अंगक और सूक्ष्म कोशिकीय प्रक्रियाएं
प्रतिदीप्ति लेबलिंग;
- किसी नमूने के भीतर विशिष्ट संरचनाओं को देखने के लिए, शोधकर्ता फ्लोरोसेंट रंगों या प्रोटीनों का उपयोग करते हैं, जो चुनिंदा रूप से अपने लक्ष्य अणुओं से बंधते हैं या उन्हें लेबल करते हैं ।
- विभिन्न फ्लोरोफोर अलग-अलग तरंगदैर्घ्य पर प्रकाश उत्सर्जित करते हैं, जिससे उपयुक्त फिल्टरों का उपयोग करके एक साथ कई संरचनाओं को लेबल किया जा सकता है और उनका चित्र बनाया जा सकता है ।
अनुप्रयोग:
- LSCM का अनुप्रयोग विभिन्न क्षेत्रों में होता है, जिनमें कोशिका जीव विज्ञान, विकासात्मक जीव विज्ञान, तंत्रिका विज्ञान और पैथोलॉजी शामिल हैं।
- इसका उपयोग कोशिका आकारिकी, प्रोटीन स्थानीयकरण, अंतःकोशिकीय यातायात, गतिशील प्रक्रियाओं और जैवअणुओं के बीच अंतःक्रियाओं का अध्ययन करने के लिए किया जाता है।
स्पष्टीकरण:
कथन A ग़लत है:
- लेजर स्कैनिंग कन्फोकल माइक्रोस्कोपी (LSCM) एक व्यापक क्षेत्र तकनीक नहीं है।
- यह बिंदु प्रकाश और बिंदु पहचान के सिद्धांत पर कार्य करता है, जहां एक केंद्रित लेजर किरण नमूने के बिंदु दर बिंदु स्कैन करती है।
कथन B सही है:
- LSCM में नमूने से उत्सर्जित प्रकाश के केवल केंद्रीय भाग को पकड़ने के लिए पिनहोल का उपयोग बेहतर स्थानिक रिजोल्यूशन प्राप्त करने में मदद करता है।
- फोकस से बाहर के प्रकाश को अस्वीकार करके, LSCM वाइड-फील्ड माइक्रोस्कोपी की तुलना में उच्च रिज़ॉल्यूशन वाले चित्र उत्पन्न करता है।
कथन C सही है:
- LSCM में स्कैनिंग दर्पण महत्वपूर्ण भूमिका निभाते हैं।
- वे लेजर किरण को नमूने पर रेखापुंज पैटर्न में स्कैन करने के लिए निर्देशित करते हैं, तथा अलग-अलग बिंदुओं से प्रतिदीप्ति को प्रकाशित और एकत्रित करते हैं।
कथन D ग़लत है:
- LSCM में पिनहोल एपर्चर का आकार छवि के रिज़ोल्यूशन पर सीधा प्रभाव डालता है।
- छोटे पिनहोल के कारण फोकस से बाहर के प्रकाश को बेहतर तरीके से अस्वीकार किया जा सकता है, जिससे रिज़ोल्यूशन बेहतर हो जाता है।
कथन E गलत है:
- LSCM में फोटोमल्टीप्लायर ट्यूब (PMTs) का उपयोग प्रतिदीप्ति संकेतों का पता लगाने के लिए किया जाता है।
- LSCM चित्र आमतौर पर ग्रेस्केल होती हैं, जो एक विशिष्ट तरंगदैर्घ्य पर प्रतिदीप्ति की तीव्रता को दर्शाती हैं।
- रंग संबंधी जानकारी विभिन्न तरंगदैर्घ्यों पर उत्सर्जित होने वाले अनेक फ्लोरोफोरों का उपयोग करके तथा ग्रेस्केल छवियों पर ओवरले करके प्राप्त की जाती है, न कि वास्तविक रंग उत्पन्न करने के लिए PMT का उपयोग करके।
अतः सही उत्तर विकल्प 3 है।
Last updated on Jun 23, 2025
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