एक 3kb के वृत्तीय प्रदव्य को विभिन्न प्रतिबन्ध एंजाइमों से पाचन के पश्चात एगरोज जेल वैद्युतकण संचलन पर प्राप्त किए गए DNA खंडो के सन्निकट लम्बाइयों को नीचे प्रदान किया गया है:

BamHI : 0.5kb, 2.5kb

HincII : 3 kb

EcoRI : 3 kb

EcoRI + BamHI : 0.5kb, 1kb, 1.5kb

EcoRI + HincII : 3kb, 1.7kb

BamHI + HincII : 0.2kb, 0.3kb, 2.5kb

उपरोक्त सूचना के आधार पर, निम्नांकित कौन सा एक कथन गलत है? 

This question was previously asked in
CSIR-UGC (NET) Life Science: Held on (6 June 2023 Shift 2)
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  1. प्रदव्य में HincII तथा EcoRI प्रत्येक का एक एकल अभिज्ञान स्थल है।
  2. HincII स्थल दो BamHI स्थलों के बीच में अवस्थित है।
  3. HincII स्थल तथा BamHI स्थलों के बीच दूरी की तुलना में EcoRI तथा BamHI स्थलों के बीच की दूरी कम है।
  4. HincII दूसरे की तुलना में एक BamHI स्थल के निकट अवस्थित है।

Answer (Detailed Solution Below)

Option 3 : HincII स्थल तथा BamHI स्थलों के बीच दूरी की तुलना में EcoRI तथा BamHI स्थलों के बीच की दूरी कम है।
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Detailed Solution

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अवधारणा:

  • प्रतिबंधन एंजाइम एंडोन्यूक्लिऐस होते हैं जो न्यूक्लिक एसिड को विभाजित करते हैं।
  • यह एक जीवाणु एंजाइम है जो एक विशिष्ट न्यूक्लियोटाइड अनुक्रम पर फॉस्फोडाइस्टर बॉन्ड को तोड़कर दोहरे स्ट्रैंड वाले डीएनए को अलग करता है। यह एंजाइम बैक्टीरिया में विदेशी डीएनए के प्रवेश को रोकता है। इसलिए, प्रतिबंध एंजाइम वायरल हमले का विरोध करने के लिए विकसित किया गया है।
  • प्रतिबंधन एंजाइम की विशेषताएं निम्नलिखित हैं:
  1. प्रतिबंधन एंजाइम प्रतिबंधन स्थल अनुक्रम को पहचानता है जो पैलिंड्रोम होते हैं।
  2. प्रतिबंधन एंजाइम स्रोतों की परवाह किए बिना प्रतिबंधन स्थलों को पहचानता है।
  3. प्रतिबंधन एंजाइम अत्यधिक विशिष्ट होते हैं क्योंकि वे केवल एक प्रतिबंधन स्थल को ही पहचानते हैं।
  • प्रतिबंधन एंडोन्यूक्लिऐस को तीन सामान्य समूहों में वर्गीकृत किया जाता है - प्रकार I, II, और III.
  • प्रतिबंधन एंजाइम प्रकार I - यह द्विकार्यात्मक एंजाइम है क्योंकि इसमें एंडोन्यूक्लिऐस और मेथुलेज़ दोनों क्रियाएँ होती हैं। इसमें तीन अलग-अलग उप इकाइयाँ होती हैं। यह प्रतिबंधन स्थल से लगभग 1000bp दूर कट जाता है।
  • प्रतिबंधन एंजाइम प्रकार II - यह एंडोन्यूक्लिऐस गतिविधि वाला एक कार्यात्मक एंजाइम है, इसमें दो समान उप इकाइयां होती हैं, यह प्रतिबंधन स्थलों पर या उसके निकट डीएनए को काटता है।
  • प्रतिबंधन एंजाइम प्रकार III - यह एंडोन्यूक्लिऐस और मिथाइलेज़ दोनों गतिविधियों वाला द्विकार्यात्मक एंजाइम है, इसमें दो उपइकाइयां होती हैं, और यह डीएनए को इसके प्रतिबंधन स्थलों से 24-26 बीपी 3' पर काटता है।

व्याख्या:

उपलब्ध कराई गई जानकारी के आधार पर, प्लाज्मिड का मानचित्र निम्नलिखित है।

विकल्प 1:

  • HincII और EcoRI दोनों ही एग्रोज़ जेल पर डीएनए का केवल एक भाग उत्पन्न करते हैं।
  • चूंकि प्लास्मिड गोलाकार होता है, इसलिए इसे एक ही स्थान पर काटने पर केवल एक ही खंड प्राप्त होगा, तथा खंड की लंबाई भी प्लास्मिड के बराबर होगी।
  • अतः यह कथन सही है।

विकल्प 2:

  • BamHI 0.5kb और 2.5kb लंबाई के दो खंड उत्पन्न करता है।
  • चूंकि प्लास्मिड डीएनए वृत्ताकार होता है और BamHI के साथ प्रतिबंधन पाचन से दो खंड उत्पन्न होते हैं, इसलिए हम कह सकते हैं कि प्लास्मिड में दो BamHI स्थल होते हैं।
  • अब जब प्लास्मिड को दो प्रतिबंधन एंजाइमों अर्थात् BamHI + HincII के साथ पचाया गया तो 0.2kb, 0.3kb, और 2.5kb लंबाई के तीन खंड बनाए गए।
  • अब यदि हम केवल BamHI और BamHI + HincII द्वारा उत्पादित खंडों की तुलना करें, तो हम देखते हैं कि दोनों मामलों में 2.5kb का खंड अवस्थित है, लेकिन जब HincII को BamHI के साथ प्रयोग किया जाता है, तो 0.5 टुकड़े विभाजित होकर 0.3 और 0.2 खंड उत्पन्न करते हैं, इसलिए हम यह निष्कर्ष निकाल सकते हैं कि HincII प्रतिबंधन स्थल दो BamHI स्थलों के बीच पस्थित है।
  • अतः यह कथन सही है।

विकल्प 3:

  • जैसा कि हम प्लाज्मिड मानचित्र में देख सकते हैं, BamHI और HincI प्रतिबंधन स्थलों के बीच की दूरी, HincI और BamHI के बीच की दूरी की तुलना में कम है।
  • अतः यह कथन गलत है।

विकल्प 4:

  • EcoRI की तुलना में HincI प्रतिबंध स्थल, BamHI प्रतिबंध स्थल के निकट है।
  • BamHI और HincI के बीच की दूरी 0.2kb है, जबकि HincI और EcoRI के बीच की दूरी 1.3kb है।
  • अतः यह कथन सही है।

अतः सही उत्तर विकल्प 3 है अर्थात HincII स्थल तथा BamHI स्थलों के बीच दूरी की तुलना में EcoRI तथा BamHI स्थलों के बीच की दूरी कम है।

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